طريقة استخدام جهاز HPLC: تفاصيل تهمك!

• ذات صلة
• طريقة عمل تحديث للاندرويد
• طريقة شراء برنامج من الاب ستور

تعرف على طريقة استخدام جهاز HPLC

يستخدم جهاز الكروماتوجرافيا السائل عالي الأداء (HPLC) لفصل حالات المادة الصلبة أو السائلة عند تحليلها، ويتميّز الجهاز بسهولة إعداده واستخدامه؛ نظرًا لاعتماده على اختبار المركبات والمذيبات المراد تحليلها بواسطة عمود داخله، فتؤثر قوة المذيب ومعدل التدفق الخاص على المواد، ويسهُل فحصها^[١]، ويمكنك استخدام الجهاز لتحليل المواد، باتباع الخطوات التالية^[٢]:

1. شغّل المضخة وكاشف الجهاز.
2. شغّل الحاسوب الموصول بالجهاز والطابعة المرافقة له.
3. فور تشغيل الجهاز ستظهر على الشاشة جملة: "Hewlett Packard System Hardware Test"، الأمر الذي يعني بَدْء النظام بالبحث عن أية مشاكل محتملة، وفي حال خلو الجهاز من المشاكل ستظهر لك كلمة "Pass".
4. اكتب "C: \> win" للدخول إلى نظام جهاز الـHPLC.
5. بعد ظهور كلمة "HP Chemistation"، انقر نقرًا مزدوجًا فوق خِيار "Instrument online HPLC system".
6. ستظهر على الشاشة مجموعة من الخيارات المتعلقة بظروف فحص العينة، مثل؛ معدل التدفق، خوّاص المذيب، والطول الموجي، والضغط.
7. انقر فوق زر تشغيل المضخة "pump on" وبعدها الضغط على "enter".
8. انقر فوق زر تشغيل المصباح "lamp on" ثم "enter"، ثم اضبط حجم الطول الموجي بما يتناسب مع نوع التحليل الذي ترغب بالقيام به.
9. اضبط حالة المضخة بإدخال القيم في الحاسوب بواسطة النقر على أيقونة "the Instrument" و"Set up pump".
   1. اضبط معدل تدفق الطور المتحرك بدءًا من 0.1 مل / دقيقة.
   2. اختر النوع المناسب من المذيب في المرحلة المتنقلة، قد يكون المذيب الاسيتونتريل، أو ماء، أو حمض الخليك، أو الميثانول، ومن الممكن خلط نوعيّن من المذيبات معًا.
10. زد معدل التدفق تدريجيًا بمعدل 0.1 مل/ دقيقة، فمع مرور الوقت سيزداد الضغط إلى أن يثبت عند المستوى المطلوب، وبعدها ستظهر كلمة "Ready" على الشاشة لإخبارك بإمكانية البَدْء.
11. كرر نفس الخطوات السابقة لمعايرة معدل التدفق كما ضبطت الضغط حتى يستقر الخط الأساسي ثم استعد لحقن العينة.
12. نظف المحقنة بالعينة قبل حقنها في جهاز الـHPLC، بعد حقنها وتحميلها، سيُظهر لك الجهاز مكونات العينة بواسطة الكاشف كما سيحسب الوقت.
13. سيعرض الجهاز ذروة كل مكون على الشاشة في وقت تكوّنه المختلف عن المادة الأخرى، في حال عدم ظهور المكونات اضغط على الزر F8 لإيقاف اكتشاف العينة.
14. سيحسب الكمبيوتر منطقة كل قمة من المواد، ثم سيدمجها سويةً ليعرض النتائج التي تبيّن العلاقة بين المكونات ونسبتها ووقت استبقائها.
15. يمكنك عرض كل جزء من التحليل بشكل منفصل بالنقر على الخِيار المخصص لذلك، وتشمل الخيارات؛ "View" و"Data analysis"، ثم "Load signal" و "Integration result" على الترتيب.

إليك أبرز استخدامات جهاز HPLC

تُعد تحديد وقياس وتنقية المواد أو المركبات الوظيفة الأساسية لجهاز HPLC، ولكن يمكن بواسطته إجراء عدد من التحاليل الكميّة والنوعيّة اللازمة عند فحص المواد في عدد من التطبيقات، وأبرزها^[٣]:

• عمليات تنقية المياه.
• يُستخدم للكشف عن الشوائب في الصناعات الدوائية.
• يُستخدم لمعرفة التراكيز الأولية لعناصر النزرة.
• كروماتوجرافيا المواد المركبة.
• كروماتوجرافيا التبادل الأيوني للبروتينات.
• كروماتوغرافيا التبادل الأيوني عالي الحموضة للكربوهيدرات، والسكريات قليلة الحموضة.

قد يُهِمُّكَ: ما فكرة عمل جهاز HPLC؟

فكرة عمل جهاز HPLC يتلخص في الفصل الكروماتوجرافي؛ وهي آلية لفصل المركبات إلى مكوناتها الأساسية، وعلى الرغم من أن مهمة جهاز HPLC هي فصل مكونات العينة، إلا أنه يُستخدم لتحديد هذه المكونات كميًّا: ومصطلح "الكروماتوجرافيا" صيغ للمرة الأولى على يد عالم النبات الروسي تسويت؛ الذي أوضح أنه عند نقل مستخلص نباتي بواسطة الأثير البترولي عبر عمود يتكون من أنبوب زجاجي معبأ بمسحوق كربونات الكالسيوم، فإن الأصباغ الخاصة بالنباتات تُفصل، وبعدها سمّى هذه الطريقة التحليلية أو التجزيئية بالـ "Chromatographie" بعد "chroma" و "Graphos"، وهي كلمات يونانية تعني "اللون" و "الرسم" على التوالي، وتُسمى هذه التقنية أحيانًا تقنية الفصل اللوني، وفكرة الكروماتوجرافيا تفصل المركبات السائلة والغازية على مرحلتين رئيستين مرحلة التنقل ومرحلة الثبات.^[٤]

المراجع

1. ↑ "Pharmaceutical HPLC Equipment", americanpharmaceuticalreview, Retrieved 5/6/2021. Edited.
2. ↑ "How to operate HPLC (High Performance Liquid Chromatography)", pioneer.netserv.chula, Retrieved 5/6/2021. Edited.
3. ↑ G.P. Thomas (15/4/2013), "High Performance Liquid Chromatography (HPLC) – Methods, Benefits and Applications", azom, Retrieved 5/6/2021. Edited.
4. ↑ "1. Principle and System Configuration of HPLC (1)", hitachi-hightech, Retrieved 5/6/2021. Edited.