مكونات جهاز HPLC: معلومات مدهشة!

مكونات جهاز HPLC: معلومات مدهشة!
مكونات جهاز HPLC: معلومات مدهشة!

تعرف على مكونات جهاز HPLC

جهاز الكروماتوغرافيا السائلة عالية الأداء (HPLC)، وتعرف أيضًا بتقنية التفكيك المخبري للخليط، لكي ينفصل إلى المواد التي يتكون منها، ويتألف من عدة مكونات في ما يلي أبرزها:[١][٢]

  • موقع الحقن: وهو المكان الذي توضع فيه العينة السائلة، ويحتوي على سائل قطبي به أطياف معروفة لتمييز مكونات العينة عن بعضها، ثم تُرسل إلى منطقة العمود، وموقع الحقن يختلف شكله واستخدامه باختلاف العلامة التجارية، فمنها ما يكون الحقن فيها آليًا ومنها ما يحتاج عامل المختبر لحقنها باستخدام إبرة حقن صغيرة.
  • المضخة: وهو الجزء الذي يدفع العينة عبر العمود، وتتفاوت قوة المضخة إلا أن أكبرها ما يصل إلى 6000 رطل لكل بوصة مربعة، مما يسمح للعينة بالمرور عبر العمود بسرعة وكفاءة أكبر.
  • العمود: وهي المنطقة التي تمر من خلالها العينة أو الخليط، ويجب أن تتألف المواد المكونة للعمود من هيدروكربونات غير قطبية؛ نظرًا لأن العينة تُذاب في مذيب قطبي، مما يُقلل من تفاعلها مع العمود خلال مرورها فيه، بالإضافة إلى مرورها السريع الذي يحد من هذا التفاعل، وعليه فإن المواد المتواجدة في العينة تخرج من العمود بالرتيب من القطبية إلى غير القطبية.
  • الكاشف: ويحتوي على مصدر ضوء فوق البنفسجي ليُضيء مكونات العينة عند خروجها من العمود، إلا أن بعض المواد العضوية تمتص مقدارًا من الضوء لذا فإن الكاشف يقيس مقدار الضوء المُمتص من شعاع الضوء المُسلط، وهذا يعني معرفة الطبيعة الدقيقة لمكونات العينة.


ما مبدأ عمل جهاز HPLC؟

يعتمد مبدأ عمل هذا الجهاز على فصل مكونات العينة وتقدير المكونات الذائبة في المذيب القطبي بدقة عالية، وتُحمل عبر عمود بواسطة غاز متحرك إما من الهيليوم أو النيتروجين، فعند حقن العينة في الجهاز تختلط مع مذيب يُعرف ذلك بالطور المتحرك، ثم بعد ذلك يُضغط بقوة كبيرة ليمر عبر عمود يحتوي على مادة تعبئة كروماتوغرافية، وخلال هذه المرحلة تنفصل أجزاء العينة وتذوب بتركيزات ضئيلة جدًا تصل إلى أجزاء التريليون، ويستخدم جهاز HPLC في نطاقات صناعية وعلمية واسعة مثل: الأدوية، الطب الشرعي، المواد الكيميائية، والمواد البيئية، والجدير بالذكر بأن وقت الاحتفاظ بالعينة يختلف في الجهاز وذلك اعتمادًا على التفاعل في كل من المرحلة الثابتة وفي الجزيئات في العمود، فمرور العينة بالعمود يعني تفاعلها بين مرحلتين مختلفتين، أولهما قطبي والثاني غير قطبي، وهذا يعني اختلاف استقطاب في التحليلات.[٣]


مَعْلومَة: عيوب جهاز HPLC

يستخدم جهاز HPLC فقط في عملية فصل المركبات البسيطة، فبالإضافة لذلكَ يستخدم لعزل بروتينات معينة عن مركَب خلوي معين، وعادةً ما يوجد في العمود حبيبات مغطاة بأجسام مضادة للبروتين المراد جمعه من الخليط الخلوي؛ وهو ما يتطلب عادةً فني عالي المهارة لمراقبة العمود ومتابعته خلال عملية الفصل من بدايتها حتى النهاية؛ وذلك للتأكد من أن العملية تسري وفق المطلوب وحسب ما هو مخطط.[٤]


الخلاصة

يستخدم جهاز HPLC لفصل العينات بدقة، ويستخدم في العديد من المجالات مثل الصناعة والطب وغيرها، وبالرغم من صعوبة استخدام الجهاز والمهارة العالية المتطلبة لاستخدامه، إلا أنه توجد العديد من المزايا والعيوب لجهاز HPLC.


المراجع

  1. Hannah Lane (7/8/2017), "Basic Components of an HPLC", sciencing, Retrieved 3/6/2021. Edited.
  2. "High Performance Liquid Chromatography HPLC Principles and Components", knauer, Retrieved 2/6/2021. Edited.
  3. "High performance liquid chromatography (HPLC)", linde, Retrieved 2/6/2021. Edited.
  4. Rebecca Burdick (9/1/2018), "What Are the Disadvantages of HPLC?", sciencing, Retrieved 2/6/2021. Edited.

68 مشاهدة